植物中如何对黄酮类进行细提取？

传统的萃取芝法有有机溶剂萃取，热水萃取，碱性水或碱性稀醇萃取体系溶剂萃取法。

乙醇和甲醇是提取黄酮类化合物最常用的溶剂，糖原的提取宜采用浓度较高的酒精(如9% ~ 9%)，糖原的提取宜采用浓度约为%的乙醇或甲醇溶液，乙酸乙酯和丙酮也常用来提取黄酮类化合物，萃取过程包括冷浸、渗滤和回流。

超声提取是一种新的提取黄酮类化合物的方法，其原理是，超声空化对细胞膜的损伤有利于黄酮类化合物的释放和溶出，超声波使萃取液不断振荡，促进了溶质的扩同时，超声波的热效应使水温基本在7℃，原料可以用于水溶，超声波法大大缩短了提取时间，提高了有效成分的提取率和原料的利用率。

微波提取技术对黄酮类化合物的提取也取得了良好的效果，具有反应效率高、选择性强、操作简单、副产物少、提取率高、纯化方便等优点。该植物细粉在浸出过程中不凝结、不结胶，克服了热水法的不足。

酶解法可用于提取细胞壁包裹的黄酮类化合物原料，例如在山楂中，由于黄酮类化合物被细胞基细胞壁包围，而这些细胞壁之间又有果胶结合，所以酶法(酶提取)的提取率比一般方法要高。

将预干燥碾碎的山楂浸泡在蒸馏水中，加热至℃，加入%果胶酶溶液，调节pH值~用mol/LNaH，在℃下酶解然后酶解溶液回流纯化。

该方法可使萃取率提高，提取原理是果胶酶充分破坏连接细胞壁的果胶物质，将山楂中的果胶完全解压为小分子物质，降低了提取物质的抗性，使果肉中的黄酮类化合物充分释放。

扩展资料：

我国对超临界萃取黄酮类化合物的研究始于9世纪，1999年陈树来等利用超临界CO从苦参米中提取芦丁，并以乙醚为夹带剂直接从苦参米中提取芦丁，结果表明，以醚作夹带剂，从苦参米中直接提取芦丁较为困难，提取效果好，纯度高，收率高。

半仿生提取法(SBE)是由孙秀梅和张昭旺首先提出的一种新的中药提取方法，如陈hsiao-chuan∽通过正交试验优化半仿生提取叫摘要杜仲中绿原酸和类黄酮工艺条件，杜仲叶为原料，有一块扭曲的柠檬酸性磷酸氢二钠缓冲溶液提取。

m(提取)m(液体)提到=分别提取pH值和787℃浸提H，每次浸提次数，在此条件下，得到了绿原酸的产率，黄酮类化合物得率达。

传统的萃取芝法有有机溶剂萃取，热水萃取，碱性水或碱性稀醇萃取体系溶剂萃取法。

乙醇和甲醇是提取黄酮类化合物最常用的溶剂，糖原的提取宜采用浓度较高的酒精（如9％ ～ 9％），糖原的提取宜采用浓度约为％的乙醇或甲醇溶液，乙酸乙酯和丙酮也常用来提取黄酮类化合物，萃取过程包括冷浸、渗滤和回流。

扩展资料：

含黄酮类高的植物：

柠檬、柑橘等含有黄酮。早年柠檬皮的提取物中的一种白色结晶被称为维生素P，实际上这是黄酮类混合物而非单一物质。

黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,总数大约有4千多种,其分子结构不尽相同,如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。银杏、山楂、蓝梅、酸果、葡萄、接骨木果、洋葱、花椰莱、绿茶等都含有黄酮。

银杏叶：银杏叶主要含黄酮类和萜烯内酯类化合物，含量很高，目前是提取黄酮的重要原料。

刺梨：这是产于云贵的一种植物，富含芦丁黄酮，是目前植物中芦丁黄酮含量最高的。

1有机溶剂提取法

甲醇和乙醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇( 如90 % 左右) 适宜于提取苷元，60 % 左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类。欧美国家采用的主要溶剂法工艺有：醇( 酮) 浸提-卤代烃萃取-酮/ 铵盐萃取法、酮浸提- 氨水沉淀- 混合酮萃取法、酮浸提卤代烃萃取-铅化物沉淀法和醇(酮)浸提-甲苯/丁醇萃取树脂法[10]。该工艺采用中等温度50℃~60 ℃浸泡，杂质较少，经浓缩、水析可除去烷基酚等脂溶性物质。用CCl4等非极性溶剂萃取除去蜡质、叶绿素等脂溶性杂质；调节pH8~9或Pb(OH)2沉降, 可除去原花青素、蛋白质、高分子单宁等杂质，有利于C4-C6酮和醇萃取有效成分和减少乳化现象，改善分层，提高有效成分的萃取率。

2微波提取法

微波加热是透入内部的能量被物料吸收置换成热能对物料的加热, 形成独特的物料受热方式, 具有均匀性的特点, 同时具有反应高效性和强选择性等特点, 而且具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。本法多用在药材的浸出, 在黄酮类化合物的提取上取得了良好的效果。李姣娟等人[11]对微波法提取川桂叶总黄酮工艺条件进行研究,以65 %乙醇按照固液比1∶20,在85 ℃条件下提取9 mi n ,连续提取2次, 总黄酮得率22.36 mg/g。此外,张瑞菊[12]采用单因子及正交实验, 考察了乙醇浓度、微波时间、微波功率及固液比对苦参黄酮类化合物提取量的影响规律。结果表明苦参黄酮类化合物提取工艺的最佳参数组合为: 乙醇体积分数10%, 微波作用时间6min,功率420W, 固液比为1∶25(g/mL)。在最佳参数组合下苦参中总黄酮的提取量可达4.83%。

3超临界萃取法

超临界流体萃取是利用超临界流体在临界压力和临界温度附近具有的特殊性能作为溶剂进行萃取的一门科学, 最常用的超临界流体为CO2。应用CO2-SPE 技术提取分离黄酮类物质, 具有萃取速度快, 效率高, 操作简单等特点, 产品中没有残留有机溶剂, 与传统的萃取分离工艺相比优势是明显的。此外, 超临界CO2萃取较易与其它先进技术联用, 成为新型而有效的分离分析技术。余希成通过单因素和正交实验研究，对超临界CO2流体萃取海金沙黄酮类化合物的工艺进行了优化设计[13]。实验结果表明, 影响萃取得率的各因素大小顺序是:萃取温度>萃取压力>流体流量>萃取时间。最佳萃取实验工艺条件为萃取温度45 ℃, 萃取压力25 MPa,流体流量3.0 L/h , 萃取时间3 h 。王正云采用超临界CO2萃取技术对芦笋中的黄酮类化合物进行了萃取研究,运用L9(34)正交表系统研究了萃取压力，萃取温度，萃取时间以及夹带剂用量对萃取率的影响[14]。确定了超临界CO2萃取芦笋总黄酮的最佳工艺条件为：温度为70 ℃、时间为2h、压力为30MPa、夹带剂(75%乙醇)用量2.0mL/g。此条件下得到总黄酮比率为1.35%，其黄酮得率是常规溶剂乙醇提取法总黄酮得率的2.7倍。

4酶辅助提取法

最近几年,随着酶技术的快速发展,科学工作者充分利用了酶的特性发展了新的提取方法。由于传统的水、酸、碱、有机溶剂提取黄酮类物质方法是利用浓度梯度使存在于植物纤维组织之内的有效成分逐步扩散到提取溶剂中,因受植物细胞壁纤维组织的屏障作用,往往萃取时间长, 需要使用大量溶剂,而且提取率较低。植物细胞壁的主要成分是纤维素, 恰当地利用纤维素酶处理,可使细胞壁发生不同程度的改变，如软化、膨胀和崩溃等,从而可改变细胞壁的通透性, 提高黄酮类化合物的提取率,黄剑波采用甜茶作材料, 采用纤维素酶辅助的方法, 从中提取黄酮类化合物[15]。首先, 确定纤维素酶的最佳作用效果, 然后通过单因素实验, 得出酶法辅助的最佳提取工艺为: 水做溶剂, 先用40 ℃下茶粉质量3%的纤维素酶作用15min,再在80℃下浸提1 h，固液比为1∶30，试验结果表明：黄酮类物质的提取率为91%，提取纯度为54 %。

5超声波辅助提取法

用超声波法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。其原理主要是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成份的浸出。王立升采用超声波提取工艺以乙醇为溶剂提取小叶榕叶中的黄酮类物质, 工艺上增加对脂溶性成分的处理[16]。通过单因素试验研究了各因素对提取率的影响, 正交试验表明影响黄酮提取率的因素主次顺序是:液固比>提取时间>乙醇浓度>超声功率。小叶榕叶提取黄酮类成分的最佳条件为:乙醇浓度60%,液固比1∶30,每次提取时间20min,功率240W,最佳条件下小叶榕叶中总黄酮的提取率达到4.38%。

以福建泉州清源山的蕨类植物为试样，对药用蕨类植物的黄酮类化合物提取方法及条件进行比较研究，考察了不同的回流装置、提取溶剂和层析材料对黄酮类化合物提取率的影响．实验结果表明，以60％的丙酮或70％的乙醇为提取溶剂、用索氏回流装置回流提取，提取液用聚酰胺或硅胶分离提纯是提取蕨类植物中黄酮类化合物的较理想的方法。

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1 传统提取方法

传统提取方法有有机溶剂提取、热水提取、碱性水或碱性稀醇提取、系统溶剂提取法等。

乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇(如90%～95%)宜于提取苷元,60%左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类物质。乙酸乙酯和丙酮也常用来提取黄酮类化合物。在提取过程中,包括冷浸法、渗漉法和回流法。

2新型提取技术

2．1超声波提取法 用超声波法提取黄酮类物质，是目前比较新 的方法。它的原理是超声波的空化作用对细胞膜 的破坏有助于黄酮类化合物的释放与溶出，超声 波使提取液不断震荡，有助于溶质扩散，同时超声 波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水溶作 用。因此，超声波法大大缩短了提取时间，提高了 有效成分的提取率和原料的利用率。

2.2 微波提取法微波技术在黄酮类化合物的提取上也取得了良好效果。它具有反应高效性和强选择性等特点,而且操作简单,副产物少,提取率高及产物易提纯等优点。浸出过程中植物细粉不凝聚不糊化,克服了热水法易凝聚易糊化的不足。

2.3 酶解法

对于一些黄酮类物质被细胞壁包围不易提取的原料可以采用酶法提取。例如山楂中,由于黄酮类物质被以纤维素为主的细胞壁所包围,并且这些细胞壁间尚有果胶粘结,因此采用酶法(酶提取)要比一般方法的提取率要高。将预先干燥并粉碎的山楂用蒸馏水浸泡,升温至45℃后,加入2%果胶酶液,用1mol/LNa0H调节pH值415～5,在45℃恒温酶解1.5～2.5h,然后将酶解溶液回流、提纯。采用这种方法,可使提取率比目前常用的方法提高2%～3%。此提取原理是果胶酶充分破坏了细胞壁间相连的果胶物质,将山楂中的果胶完全分解成小分子物质,使提取物质阻力减小,使果肉中的黄酮类物质充分地释放出来。

2.4 超临界流体萃取法

我国对超临界萃取黄酮类化合物的研究始于20世纪90年代。1996年,陈庶来等用超临界CO2从槐花米中提取芦丁,以乙醚为夹带剂,进行了从槐花米中直接萃取芦丁和先对槐花米进行预处理得粗提物,然后再对粗提物进行萃取的研究。结果表明,在以乙醚为夹带剂的情况下,直接从槐花米中萃取芦丁较困难,用粗提物进行萃取,效果好,纯度和得率都较高。

2．5半仿生提取法 半仿生提取法（semi－bionic extraction method， 简称SBE法）是孙秀梅、张兆旺等首先提出的关 于中药提取的新工艺∞卜3 3l。陈晓娟等∽3通过正 交试验优选半仿生法提取杜仲叶中绿原酸和黄酮 的工艺条件为：杜仲叶为原料，以磷酸氢二钠一柠 檬酸的缓冲溶液作为提取液，m（杜仲叶）：m（提 取液）＝1：20，提取液pH值分别为2．0、7．5、8。3 在70℃，每次提取1 h，提取3次；在此条件下，绿 原酸的得率达1．44％，黄酮得率达0．044％。

参考文献：