草莓脱毒苗工厂化生产技术激素的配置有哪些
配置有:
(1)母液的配置
(2)培养基配置
以配置1000mL培养基为例,具体操作步冲配携骤如下:
在1000mL的烧杯中先加入少量蒸馏水,分别添加母液Ⅰ20mL,母液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各10mL,母液Ⅴ5mL.
加入蔗糖30g.
根据用途培养基分为初代培养基、增殖培养基和生根培养基,要根据其不同用途、不同草莓品种对应添加不同种类的生长调节剂。
用玻璃杯充分搅拌后,再用蒸馏水定容到1000mL.
调节pH值至5.7~5.8.
添加琼脂粉7~8g.
加热至琼脂粉溶解后分装到试管或培养瓶中。
(3)培养基灭菌
分装完成后,将试管或培养瓶放入高压灭菌锅中,在温度121℃时,高压灭菌15分钟,灭菌结束后及时取出,冷却后放入无菌接种室中待用。
3、无菌操作步骤
接种3天前用甲醛熏蒸接种室,接种前3小时打开紫外线灯进行杀菌。
在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯。
接种员先洗净双手,换好专用实验服。
上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,然后搽拭工作台面。
先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处。
接种时,接种人员双手不能离开工作台,不能说话、走动或咳嗽等。
在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。
接种完毕后要清理干净工作台,用紫外线灯灭菌30分钟。
4、 初代培养
在无菌条件下,取已消毒的匍匐茎生长点0.2~0.5mm,接种到已灭菌的培养基上,1周左右茎尖转绿并萌动,20~30天形成芽丛。
5、继代培养
无菌条件下将已分化的芽丛切割,转入增殖培养基中进行增殖。45天后卖扒每个芽可获5~7个腋芽芽丛。
6、 生根培养
当增殖芽数量达到生产要求时,转入生根培养基中进行生根培养。生根时间为20~30天。
7、 驯化培养
当生根苗的根系长度达到1.5cm时,将瓶苗移到温散伏室中,逐步开启培养瓶盖,驯化3~5天,然后将苗取出,清洗掉沾在根部的培养基,将苗定植于营养钵或穴盘中驯化培养。驯化培养条件:温度18~25℃,湿度85%~100%,遮阳网遮光50%,新根生出后去除遮阳网。待苗长出4~5片新叶时,就可以作为原种苗进行移栽种植。